有毒，虎斑游蛇最可怕的地方在于其毒性“无解”。
在20世纪70~80年代，国内蛇类专家普遍认为虎斑游蛇无毒，这一观点在解剖学上有一定依据。
研究发现，虎斑游蛇上颌的最后2~3枚牙齿较大，和毒蛇的牙齿相似。但其牙齿表面无沟，内部也无中空的毒液导管，头部亦没有分泌毒液的腺体，据此可以得出结论：其牙齿并不是毒牙。这一切的秘密就在于虎斑游蛇的颈后腺上。
20世纪90年代，安徽省黄山市某毒蛇研究所的学者发现了一种特殊的现象：在一次偶尔触怒虎斑游蛇时，蛇颈处突然喷射出了不明液体，不偏不倚刚好射入了工作人员的眼中，当场就引发了红肿、疼痛。这一现象引起了研究所的高度关注，随即对虎斑游蛇的蛇颈部位进行了研究。
经过解剖，研究人员在虎斑游蛇的顶鳞后脊两侧发现了11对颈后腺！这些腺体长约3cm，宽约0.8cm，左右对称排列成葡萄状，无腺导管和口腔牙基相连，因此是一个独立的“制毒系统”。
